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    革蘭氏陽性菌質粒大量提取試劑盒

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    品名 規格 包裝 單價 貨期
    革蘭氏陽性菌質粒大量提取試劑盒 10T 627元 現貨
    性狀:
    試劑盒組成 10T
    RNase A 1ml
    溶菌酶 10ml
    溶液Ⅰ 60ml
    溶液Ⅱ 60ml
    溶液Ⅲ 80ml
    漂洗液 15ml×2
    洗脫液 30ml
    吸附柱 10個
    收集管 20個
    說明書 1份
    質量標準:
    產品簡介:本試劑盒先用溶菌酶處理,再用堿裂解法裂解細胞,通過吸附柱在高鹽狀態下特異性地結合溶液中的DNA的特性提取質粒DNA。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA,可最大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。從50-100ml培養液中,可快速提取200-300μg純凈地高拷貝質粒DNA,提取率達85-90%。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規的分子生物學試驗,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。

    注意事項:

    1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA 全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
    2、第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙  醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
    3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現混濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。

    4、洗脫緩沖液體積不應少于500ul,體積過小影響回收效率;洗脫液的pH 值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其 pH值在8.0左右( 可用NaOH 將水的pH值調至此范圍) ,pH值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20 ℃,以防DNA降解。

    5、如果所提質粒為低拷貝質?;虼笥?nbsp;10kb的大質粒,應加大菌體使用量,使用400-800ml過夜培養物,同時按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量,吸附和洗脫時可以適當的延長時間,以增加提取效率。

    6、DNA濃度及純度檢測:得到的質粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。得到的DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。DNA應在OD260處有顯著吸收峰, OD260 值為1 相當于大約50 μg/ml 雙鏈DNA、40 μg/ml 單鏈DNA。OD260/OD280比值應為1.7-1.9 ,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。


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